Come si sviluppa la neutropenia nei cani

1 Qual è la morfologia dei neutrofili negli animali?

I neutrofili dei primati (compreso l'uomo) sono più evidentemente colorati con particelle speciali, mentre il citoplasma dei neutrofili bovini è rosa perché contiene grandi particelle terziarie. I nuclei dei neutrofili sono profondamente colorati e densi e sono divisi in 3-5 lobi. Nello striscio di sangue, i neutrofili sono leggermente più piccoli degli eosinofili e dei basofili.



Le vescicole a bastoncino sono piccoli lobi nucleari rotondi collegati al nucleo dei neutrofili da un sottile filamento. Si trova normalmente in un piccolo numero di neutrofili nelle femmine e rappresenta il secondo cromosoma X inattivato. La sua struttura è simile a quella delle vescicole bacillari nelle cellule epiteliali delle femmine. Se le vescicole bacillari sono presenti in un gran numero di neutrofili nei maschi, ciò indica disordini cromosomici, come la sindrome XXY nei falaropi maschi.

3 Qual è la funzione principale dei neutrofili?

Nell'infiammazione acuta, i neutrofili presenti nel sangue devono entrare nei tessuti e agire come cellule di attacco in prima linea. Nel sito dell'infiammazione vengono rilasciate chemochine come l'interleuchina-8 (IL-8) e il complemento (C5a), che causano l'accumulo di neutrofili. Il loro ruolo principale è la fagocitosi e l'uccisione dei batteri. I neutrofili utilizzano una serie di metodi per attaccare i batteri nel fagosoma, tra cui la formazione di radicali di ossigeno, come l'anione superossido e il perossido di idrogeno, e la reazione tra la perossidasi e il perossido di idrogeno nei neutrofili per produrre acido ipocloroso. In sintesi, questi radicali di ossigeno e altri ossidi danneggiano le membrane lipidiche delle cellule bersaglio. Inoltre, i neutrofili rilasciano anche proteine con attività antimicrobica, come le defensine e il lisozima.

4 Qual è il processo di produzione dei neutrofili?

Il midollo osseo produce granulociti e monociti che hanno origine da una cellula staminale comune. In risposta ai fattori delle cellule staminali e all'interleuchina-6 (IL-6), le cellule staminali pluripotenti proliferano e si differenziano in cellule progenitrici specifiche del lignaggio, che possono differenziarsi in neutrofili, monociti, eosinofili o basofili. Le cellule progenitrici si differenziano ulteriormente in cellule precursori, che possono essere osservate negli strisci del midollo osseo. I precursori dei leucociti granulocitari (granulociti primitivi, precoci e intermedi) subiscono cinque divisioni mitotiche e subiscono un cambiamento nella forma del nucleo (rotondo - dentellato - lobulato), una graduale condensazione della cromatina nucleare e la comparsa di granuli asplofili o specializzati nel citoplasma mentre si differenziano in granulociti maturi. Negli animali sani, una cellula mieloide forma 16 o 32 neutrofili lobulati maturi per replicazione in 6 giorni. Durante la fase infiammatoria, invece, questo tempo di maturazione si accorcia per aumentare il numero di neutrofili trasferiti ai tessuti.

5 Cos'è il fattore stimolante le colonie

Il fattore stimolante le colonie (CSF) è un gruppo di glicoproteine che stimola la produzione di neutrofili e monociti da parte del midollo osseo. CSF) e il fattore stimolante le colonie macrofagiche (M-CSF). Queste citochine impediscono l'apoptosi dei precursori dei neutrofili e dei monociti e questo meccanismo apoptotico ha lo scopo di limitare normalmente il numero di cellule mature nel midollo osseo. Poiché il CSF prolunga la vita dei precursori, determina un aumento dei neutrofili e dei monociti nel sangue. Inoltre, il CSF aumenta l'attività funzionale dei neutrofili e dei monociti maturi.

6 Come identificare le diverse frazioni di neutrofili nel sangue e nel midollo osseo

a. Pool circolante. Il sangue che scorre nei vasi sanguigni contiene un gran numero di neutrofili frazionati e i neutrofili nel quadro leucocitario derivano dal pool circolante.

b. Il pool marginale. Molti neutrofili fogliettati sono in stretto contatto con le cellule endoteliali nei capillari e nelle microvenule postcapillari, sempre pronti a entrare nel tessuto. Questi neutrofili non sono presenti nel sangue libero e quindi non si riflettono nel quadro leucocitario. Il pool circolante e il pool marginale hanno un numero di neutrofili approssimativamente uguale, ad eccezione del gatto, il cui pool marginale contiene un numero di neutrofili tre volte superiore a quello del pool circolante.

c. Pool di stoccaggio. Il pool di stoccaggio è costituito da neutrofili non divisi nel midollo osseo, compresi i neutrofili lobulati, i neutrofili a bastoncello e i neutrofili tardo-giovanili. Queste cellule precursori continuano a differenziarsi in neutrofili lobulati e sono in grado di soddisfare le esigenze del cane per diversi giorni. Il pool di stoccaggio è la maggiore fonte di neutrofili.

d. Pool proliferativo. Il pool proliferativo è costituito dai precursori dei neutrofili che si dividono attivamente nel midollo osseo e comprende granulociti primitivi, precoci e intermedi.

7. Gli altri leucociti presenti nel midollo osseo e nel sangue sono simili ai neutrofili? Contengono anche componenti diversi?

Come i neutrofili, anche gli eosinofili e i monociti del sangue hanno un pool circolante e un pool marginale. Tuttavia, queste cellule non hanno un pool di stoccaggio nel midollo osseo. I linfociti sono immagazzinati principalmente nel tessuto linfoide, non nel midollo osseo o nel sangue.

8 Cos'è lo spostamento nucleare verso sinistra

Uno spostamento nucleare verso sinistra indica la presenza di precursori dei neutrofili nel sangue, di solito sotto forma di un numero maggiore di neutrofili a forma di bastoncello, mentre i precursori tardivi e precoci sono meno comuni. Lo spostamento a sinistra nucleare si verifica quando il pool ematico e il pool di stoccaggio del midollo osseo sono esauriti dalla migrazione di un gran numero di neutrofili frazionati verso il sito dell'infiammazione. A questo punto, i neutrofili a bastoncino (e i precursori precoci) lasciano il midollo osseo in modo immaturo. Sebbene lo spostamento nucleare sinistro sia solitamente causato da un'infezione batterica, anche alcuni fattori non infettivi che scatenano l'infiammazione possono causare lo spostamento nucleare sinistro, come la necrosi dei tessuti e le malattie immuno-mediate.

9 Esistono diverse categorie di spostamento nucleare sinistro

Se aumentano sia i neutrofili lobulati che quelli a bastoncello, ciò indica uno spostamento nucleare sinistro rigenerativo. Questo spostamento è relativamente favorevole perché la capacità del midollo osseo di produrre granulociti può mantenere una maggiore concentrazione di neutrofili lobulati durante l'infiammazione. Non esiste una definizione chiara di spostamento nucleare sinistro degenerativo. Alcuni considerano lo spostamento nucleare sinistro degenerativo come l'opposto dello spostamento nucleare sinistro rigenerativo, con concentrazioni di neutrofili lobulati pari o inferiori al range di riferimento, accompagnate da un aumento dei neutrofili a forma di bastoncino (precursori precoci). Altri ritengono che lo spostamento nucleare sinistro degenerativo si riferisca a una concentrazione assoluta di neutrofili a bastoncello superiore a quella dei neutrofili lobulati, il che è raro. Sebbene la definizione sia controversa, lo spostamento nucleare sinistro degenerativo è chiaramente più preoccupante dello spostamento nucleare sinistro rigenerativo. Lo spostamento nucleare sinistro degenerativo è dovuto alla soppressione della granulopoiesi e/o all'eccessiva richiesta di neutrofili nel sito dell'infiammazione, con conseguente insufficiente capacità del midollo osseo di produrre granulociti per mantenere le normali concentrazioni di neutrofili frazionati.

10 Che cos'è la neutrofilia matura

Il quadro leucocitario della neutrofilia matura comprende un'aumentata concentrazione di neutrofili fogliati e l'assenza di neutrofili a forma di bastoncello (o precursori precoci). Questo quadro leucocitario può essere osservato in una varietà di malattie e questo risultato non è specifico se non si conosce la gravità della neutrofilia. Il quadro leucocitario della neutrofilia matura può essere riassunto come neutrofilia priva di spostamento nucleare verso sinistra.

11 Cos'è lo spostamento nucleare verso destra

Lo spostamento nucleare verso destra si manifesta con un aumento del numero di neutrofili con un'eccessiva lobulazione nucleare, che può essere di 5 o più lobi. Il conteggio della selezione dei leucociti non include i neutrofili con un'eccessiva lobulazione nucleare, quindi lo shift nucleare destro non può essere quantificato allo stesso modo dello shift nucleare sinistro. Quando i neutrofili circolano nel flusso sanguigno per un periodo di tempo prolungato, spesso compaiono neutrofili con lobulazione eccessiva e senescenza. Lo spostamento nucleare verso destra si verifica più spesso negli animali trattati con glucocorticoidi o iperadrenocorticismo (soprattutto nei cani) perché i glucocorticoidi inibiscono la migrazione dei neutrofili dai vasi sanguigni e ne prolungano la circolazione. L'iperlobulazione dovuta a un alterato sviluppo dei neutrofili è più rara, come nel caso della macrocitosi VIP, del malassorbimento di VB12 dello schnauzer gigante e della displasia del midollo osseo negli animali con leucemia mieloide.

12 Qual è la forma più grave di neutrofilia nel quadro di stress leucocitario?

La concentrazione di neutrofili frazionati nel quadro leucocitario da stress tende ad aumentare fino a due o tre volte il limite superiore dell'intervallo di riferimento. Ad esempio, con i glucocorticoidi endogeni o esogeni, le concentrazioni di neutrofili frazionati nei cani possono raggiungere i 35.000 neutrofili/uL. Molte leucocitosi infiammatorie con neutrofilia matura assomigliano alla leucocitosi da stress e sarebbero difficili da identificare senza un'anamnesi e un esame clinico.

13 Quali sono i principali meccanismi che causano la neutropenia?

a. Eccesso di migrazione dei neutrofili verso i tessuti durante l'infiammazione (infezione batterica acuta, sepsi, necrosi)

b. marginalizzazione indotta da endotossine (spostamento dei neutrofili dal pool circolante a quello marginale)

c. Riduzione della produzione di granulociti da parte del midollo osseo.

(1) Virus (virus della leucemia felina, virus dell'immunodeficienza felina, microvirus)

(2) Infiltrazione di cellule intramidollari (soppressione del midollo osseo, ad esempio linfosarcoma, mielofibrosi, sarcoidosi).

(3) Tossine (estrogeni canini e tossicità da sulfadiazina)

(4) Ereditarietà (Tanbirian belga adulto, collie grigi con ematopoiesi periodica).

d. Aumento della distruzione dei neutrofili (neutropenia immuno-mediata)

14 Perché l'endotossemia causa neutropenia

Uno degli effetti sistemici dell'endotossina è quello di aumentare l'adesione dei neutrofili del sangue alla superficie endoteliale attivando le molecole di adesione, il che porta a una ridistribuzione dei neutrofili nel sangue, cioè dal pool circolante al pool limbico, e si manifesta come una grave neutropenia. Sebbene i neutrofili del pool marginale rimangano nel sangue, non compaiono nel quadro leucocitario, un cambiamento noto come pseudogranulocitopenia. Quest'ultima è solo un'alterazione acuta e temporanea, seguita da neutrofilia, dovuta alla capacità dell'endotossina di promuovere il rilascio di neutrofili dal pool di stoccaggio del midollo osseo.

15 Perché l'infezione da microvirus causa una grave leucopenia

Le cellule bersaglio dei microvirus canini e felini sono cellule in rapida mitosi, comprese le cellule precursori ematopoietiche. La breve emivita dei neutrofili e l'alterata produzione di granulociti determinano una rapida deplezione dei neutrofili nel sangue e nel midollo osseo. Inoltre, la neutropenia è ulteriormente esacerbata dal distacco necrotico dell'epitelio intestinale villoso dovuto all'attacco virale alle cellule della ghiandola intestinale, con conseguente aumento dell'assorbimento intestinale di endotossine. Le alterazioni ematologiche tipiche dell'infezione da microvirus sono neutropenia senza trombocitopenia o anemia.

16 Quali sono i due meccanismi che causano la neutrofilia?

a. De-marginalizzazione dei neutrofili nel sangue e/o rilascio del pool di midollo osseo

(1) glucocorticoidi (somministrazione, iperadrenocorticismo)

(2) adrenalina (ansia, sforzo fisico)

b aumento della produzione di granulociti e rilascio dei pool di stoccaggio del midollo osseo

(1) Malattie infiammatorie: infettive (batteriche, fungine, addominali trasmesse dal gatto); non infettive (immuno-mediate, necrosi, emolisi)

(2) paraneoplastiche (tumori che producono liquor)

(3) Leucemia granulocitica acuta o cronica.

17 Quali tessuti sviluppano un'infiammazione senza segni di leucociti infiammatori?

L'infiammazione neutrofila nella vescica, nell'intestino, nell'epidermide e nel sistema nervoso centrale di solito non causa cambiamenti significativi nel quadro leucocitario. Ciò è dovuto al fatto che questi siti non sono protetti da mediatori infiammatori (ad esempio, CSF) o dall'isolamento dei tessuti. Pertanto, non c'è una risposta infiammatoria sistemica nella granulopoiesi e nel quadro leucocitario.